Kā tiek izmantoti restrikcijas enzīmi, veicot gēla elektroforēzi?
Kā tiek izmantoti restrikcijas enzīmi, veicot gēla elektroforēzi?

Video: Kā tiek izmantoti restrikcijas enzīmi, veicot gēla elektroforēzi?

Video: Kā tiek izmantoti restrikcijas enzīmi, veicot gēla elektroforēzi?
Video: Varlinas tiesiogiai - 2022 02 22 - Devoliucija 9 dalis ir klausimai - atsakymai 2024, Maijs
Anonim

1 Atbilde. Lai sagrieztu DNS, RNS vai plazmīdu plkst ierobežojums vietnes (piemēram, EcoRI, BamHI, hindIII un BglII), lai izveidotu mazākus ģenētiskos fragmentus, kurus var atdalīt un tādējādi raksturot, izmantojot gēla elektroforēze.

Līdzīgi var jautāt, kāda ir restrikcijas enzīmu loma?

A restrikcijas enzīms ir proteīns, kas atpazīst specifisku, īsu nukleotīdu secību un sagriež DNS tikai šajā konkrētajā vietā, kas ir pazīstama kā ierobežojums vieta vai mērķa secība. Dzīvās baktērijās, restrikcijas enzīmu funkcija aizsargāt šūnu pret vīrusu bakteriofāgiem.

Kā arī zināt, kuru restrikcijas enzīmu izmantot? Izvēloties restrikcijas enzīmus, vēlaties izvēlēties fermentus, kas:

  1. Nolieciet ieliktni sānos, bet negrieziet ieliktni iekšpusē.
  2. Atrodas vajadzīgajā vietā jūsu saņēmēja plazmīdā (parasti daudzkārtējā klonēšanas vietā (MCS)), bet negrieziet citur plazmīdā.

Papildus tam, kā pētniecībā tiek izmantoti restrikcijas enzīmi?

Laboratorijā, restrikcijas enzīmi (vai restrikcijas endonukleāzes ) ir lietots lai sagrieztu DNS mazākos fragmentos. Izgriezumi vienmēr tiek veikti noteiktās nukleotīdu secībās. Savādāk restrikcijas enzīmi atpazīt un izgriezt dažādas DNS sekvences.

Kāda ir gēla elektroforēzes loma?

Gēla elektroforēze ir paņēmiens, ko izmanto DNS fragmentu atdalīšanai pēc to lieluma. DNS paraugus ievieto iedobēs (ievilkumos) vienā galā a želeja , un tiek pielietota elektriskā strāva, lai tās izvilktu cauri želeja . DNS fragmenti ir negatīvi uzlādēti, tāpēc tie virzās uz pozitīvo elektrodu.

Ieteicams: