Satura rādītājs:

Kā ievietot gēnu plazmīdā?
Kā ievietot gēnu plazmīdā?

Video: Kā ievietot gēnu plazmīdā?

Video: Kā ievietot gēnu plazmīdā?
Video: DNA cloning and recombinant DNA | Biomolecules | MCAT | Khan Academy 2024, Novembris
Anonim

Pamata soļi ir:

  1. Izgrieziet plazmīda un "ielīmējiet" mapē gēns . Šis process balstās uz restrikcijas enzīmiem (kas sagriež DNS) un DNS ligāzi (kas savieno DNS).
  2. Ievietot uz plazmīda iekšā baktērijas.
  3. Izaug daudz plazmīda -pārnēsā baktērijas un izmanto tās kā "rūpnīcas" olbaltumvielu ražošanai.

Kā arī gēnu var ievietot plazmīdā GCSE?

tas ir ievietots plazmīdā izmantojot ligāzes enzīmus. uz plazmīda iet iekšā baktēriju šūna. transgēnā baktērija vairojas, kā rezultātā iekšā miljoniem identisku baktēriju, kas ražo cilvēka insulīnu.

Turklāt, kā subklonēt gēnu? Pamata soļi, lai Subklonēšana Jūs atbrīvojat un attīrāt savu ieliktni no vecākvektora, sasiet šo ieliktni sagatavotā mērķa vektorā, pārveidojot šo ligācijas reakciju kompetentās baktēriju šūnās. Pēc tam jūs pārmeklējat pārveidotās šūnas ievietojumam.

Ņemot to vērā, kādi ir 4 gēnu klonēšanas soļi?

Klasiskajos restrikcijas enzīmu gremošanas un ligācijas klonēšanas protokolos jebkura DNS fragmenta klonēšana būtībā ietver četras darbības:

  • interesējošās DNS (vai mērķa DNS) izolēšana,
  • nosiešana,
  • transfekcija (vai transformācija) un.
  • skrīninga/atlases procedūra.

Kā pastiprināt plazmīdu?

Eksperimentāla procedūra

  1. Palaidiet PCR un attīriet PCR produktu: palaidiet PCR, lai pastiprinātu ievietoto DNS.
  2. Sagremot savu DNS:
  3. Izolējiet ieliktni un vektoru, attīrot gēlu:
  4. Pievienojiet ievietojumu vektorā:
  5. Transformācija:
  6. Izolējiet gatavo plazmīdu:
  7. Pārbaudiet savu plazmīdu, veicot secību:

Ieteicams: